万强第一眼看到这个培养进度的时候还以为自己看错了,不过经过再三确认之后万强决定开始提取电次蛋白。
提取蛋白的方法也很简单,这种蛋白一开始就被设计得比较容易提纯,只需要将293te破碎裂解,并将那些沉积在下方的细胞膜等无法溶解在裂解液中的杂质去除出去。
再通过ph值56的电解液分梯度提纯之后就可以得到较为纯净的电次蛋白溶液。
总共估计300l血清经过不断地消耗和提纯之后,万强终于意识到为什么高桥优子的产量那么低了。
并不是因为293te细胞非常难以培养,也不是因为实验方式不对,而是因为在第一阶段的蛋白质折叠中出了大问题。
在万强的观察下,本应该附着在钯金属气凝胶上的长链蛋白扭曲着打着转,不断地在溶液中凝结之后又溶解了。
这代表钯金属气凝胶的引导功能正常,但是在持续引导方面出了问题。联想到这是一种经过多次折叠,而且每次折叠都需要不同ph值环境的复杂蛋白,万强的内心有了一个初步的想法。
之所以孤行州立大学的实验室内无法提高产量,主要是因为他们采用了错误的引导方法。
要知道,蛋白质是有氨基酸组成的,而氨基酸之间首尾相连的结构就被称为一级结构,也就是前后排手拉手的结构。
但由于氨基酸之间的r基和各类基团都有自己的属性,因此蛋白质还会发生二次折叠,也就类似于拧麻花一般的二级结构。
根据不同层级不同形态的折叠,也就有了不同的结构等级。
而一级结构正是最基础的结构。
在万强看来,由于电次蛋白的一级结构是长链结构,非常容易在钯金属气凝胶表面堆积,进而造成蛋白质链条之间的不正确折叠和纠缠,最终造成电次蛋白在初次提纯折叠过程中就损失殆尽,而且会导致大量的非目标蛋白出现在电解液中。
而万强因为稍微改进了凝结措施,将钯金属气凝胶切割成小块的‘核’分别放置于不同ph值的电解液下,因此才有机会观察到这一现象的产生原因。
万强的解决方法也很简单,如果蛋白之间会产生错误的折叠,那么这些错误折叠的纤维强度一定不够,因此只需要让钯金属气凝胶在电解液中旋转就可以解决这一问题。……
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